sechenovSechenov Medical JournalСеченовский вестник2218-73322658-3348Сеченовский Университетsechenov-53Research ArticleСтатьиDETERMINATION OF A BIOLOGICALLY ACTIVE COMPOUND OF KON- 1 IN BLOOD PLASMA BY METHOD OF HIGH-PERFOMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY WITH MINIMUM SAMPLE PRETREATMENTPROCEDURE: DEVELOPMENT AND VALIDATION OF THE METHOD, USE IN PRE-CLINICAL PHARMACOKINETIC RESEARCHESОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО СОЕДИНЕНИЯ КОН-1 В ПЛАЗМЕ КРОВИ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙХРОМАТОГРАФИИ С МИНИМАЛЬНОЙ ПРОБОПОДГОТОВКОЙ: РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕВ ДОКЛИНИЧЕСКИХ ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХБулгаковаЕ. А.BulgakovaE. A.noemail@neicon.ruКарпенкоЮ. Н.KarpenkoYu. N.karpenko_pfa@mail.ruФГБОУ ВО ПГФА Минздрава РоссииРоссияPerm State Pharmaceutical AcademyRussian FederationФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России; ООО «Парма Клиникал»РоссияPerm State Pharmaceutical Academy; LLC “Parma Clinical”Russian Federation201830032018016065Copyright © Bulgakova E.A., Karpenko Y.N., 20182018Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н.Bulgakova E.A., Karpenko Y.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.sechenovmedj.com/jour/article/view/53

The aim of this work was the development and validation of methods for determination of biologically active compound KOH-1 with proven nootropic activity in blood plasma by high performance liquid chromatography (HPLC) with ultraviolet detection (HPLC-UV). A simple, rapid and unlaborious procedure was proposed for sample preparation of plasma for chromatographic analysis, which ensures a high percentage of analyte extraction from the bioobject (more than 80%). Under the developed conditions, the lower limit of the quantitative determination of KOH-1 in plasma was 35 ng /ml. Estimated as a result of validation the precision of the method did not exceed 7%, the accuracy of the method was 93,5 - 112,8%. The developed bioanalytical technique was tested on blood samples of laboratory animals and humans and used in preclinical pharmacokinetic studies.

Целью настоящей работы явилась разработка и валидация методики определения биологически активного соединения КОН-1 с доказанной ноотропной активностью в плазме крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектированием (ВЭЖХ-УФ). Предложена простая, экспрессная и нетрудоемкая процедура пробоподготовки плазмы к хроматографическому исследованию, обеспечивающая высокий процент извлечения аналита из биообъекта (более 80%). В разработанных условиях нижний предел количественного определения КОН-1 в плазме составил 35 нг/мл. Оцененная в результате валидации прецизионность методики не превышала 7%, границы правильности методики составили 93,5 - 112,8 %. Разработанная биоаналитическая методика апробирована на образцах крови лабораторных животных и человека и использована в доклинических фармакокинетических исследованиях.

КON-1high-performance liquid chromatographyvalidationpharmacokinetic studiesReferencesШуклина Н.С., Колла В.Э Антиамнестическое действие производных ряда 3-гидрокси-3-пирролин-2-она / Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003; 66 (6): 12-15.Шуклина Н.С., Колла В.Э Антиамнестическое действие производных ряда 3-гидрокси-3-пирролин-2-она / Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003; 66 (6): 12-15.Борисова Е.О. Основы фармакокинетики лекарственных средств / Справочник поликлинического врача. 2014; 6: 44-51.Борисова Е.О. Основы фармакокинетики лекарственных средств / Справочник поликлинического врача. 2014; 6: 44-51.Медведев Ю.В., Раменская Г.В., Шохин И.Е. и др. Разработка и валидация методики определения тенофовира в плазме крови кроликов / Сеченовский вестник. 2011; 3(5) - 4 (6): 24-30.Медведев Ю.В., Раменская Г.В., Шохин И.Е. и др. Разработка и валидация методики определения тенофовира в плазме крови кроликов / Сеченовский вестник. 2011; 3(5) - 4 (6): 24-30.Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н., Ярыгина Т.И. Определение производного 3-гидрокси-3-пирролин-2-она в моче и изучение его экскреции из организма лабораторных животных / Фармация и фармакология. 2017; 5 (4): 331-343.Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н., Ярыгина Т.И. Определение производного 3-гидрокси-3-пирролин-2-она в моче и изучение его экскреции из организма лабораторных животных / Фармация и фармакология. 2017; 5 (4): 331-343.Bakhtiar R., Majumdar T. Tracking problems and possible solutions in the quantitative determination of small molecule drugs and metabolites in biological fluids using liquid chromatography-mass spectrometry / J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 2007; 55 (3): 227-243. 10Bakhtiar R., Majumdar T. Tracking problems and possible solutions in the quantitative determination of small molecule drugs and metabolites in biological fluids using liquid chromatography-mass spectrometry / J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 2007; 55 (3): 227-243. 10Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н., Ярыгина Т.И. Разработка методики количественного определения биологически активного соединения, производного 3-гидрокси-3-пирролин-2-она, в плазме крови методом тандемной хроматомасс-спектрометрии / Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2017; 2: 106-111.Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н., Ярыгина Т.И. Разработка методики количественного определения биологически активного соединения, производного 3-гидрокси-3-пирролин-2-она, в плазме крови методом тандемной хроматомасс-спектрометрии / Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2017; 2: 106-111.Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н., Ярыгина Т.И. Выбор способа пробоподготовки плазмы крови для хроматографического определения биологически активного соединения КОН-1 / «Создание конкурентоспособных лекарственных средств - приоритетное направление инновационного развития фармацевтической науки». Мат. Всероссийской научно-методической конференции с международным участием, посвященной 80-летию ПГФА. Пермь, 2016; 18: 54-57.Булгакова Е.А., Карпенко Ю.Н., Ярыгина Т.И. Выбор способа пробоподготовки плазмы крови для хроматографического определения биологически активного соединения КОН-1 / «Создание конкурентоспособных лекарственных средств - приоритетное направление инновационного развития фармацевтической науки». Мат. Всероссийской научно-методической конференции с международным участием, посвященной 80-летию ПГФА. Пермь, 2016; 18: 54-57.Кляшева О.Н. Разработка методик анализа и стандартизация нового биологически активного соединения КОН-1, проявляющего ноотропное действие: автореф. дис. канд. фарм. наук. Пермь, 2014. 21 с.Кляшева О.Н. Разработка методик анализа и стандартизация нового биологически активного соединения КОН-1, проявляющего ноотропное действие: автореф. дис. канд. фарм. наук. Пермь, 2014. 21 с.Guidance for Industry: Bioanalytical method validation / U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER). U.S. Government Printing Office. Washington, DC, 2001. 25 p.Guidance for Industry: Bioanalytical method validation / U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER). U.S. Government Printing Office. Washington, DC, 2001. 25 p.Guideline on validation of bioanalytical methods (draft) / European Medicines Agency. Committee for medicinal products for human use. London, 2009. 23 p.Guideline on validation of bioanalytical methods (draft) / European Medicines Agency. Committee for medicinal products for human use. London, 2009. 23 p.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.